PCR檢(jian)測實(shi)驗(yan)室建設(she)是壹(yi)個復(fu)雜(za)而精(jing)細的(de)過(guo)程(cheng),它(ta)涉(she)及到(dao)多(duo)個方面的(de)考量(liang)。以(yi)下(xia)是對其(qi)註意(yi)事(shi)項的(de)具(ju)體介紹(shao):
1.實(shi)驗(yan)分(fen)區(qu)
分(fen)區(qu)設(she)置(zhi):PCR實(shi)驗(yan)室應分為(wei)試劑儲(chu)存(cun)和(he)準備區(qu)、樣(yang)品(pin)制備(bei)區(qu)、擴(kuo)增(zeng)區(qu)以(yi)及擴增(zeng)產(chan)物(wu)分析(xi)區(qu)。這(zhe)樣(yang)的(de)分區(qu)有(you)助(zhu)於防(fang)止交叉(cha)汙染,確保(bao)實(shi)驗(yan)的(de)準確(que)性。
專(zhuan)用(yong)走廊(lang):較(jiao)為(wei)理想的(de)PCR實(shi)驗(yan)室設(she)計(ji)中(zhong),應(ying)有壹(yi)個專用(yong)走廊(lang)連接(jie)各(ge)個區(qu)域(yu),以進(jin)壹(yi)步減少(shao)不同(tong)區(qu)域(yu)間(jian)的(de)幹擾和(he)汙染風險。
2.清潔消毒(du)
定期(qi)清(qing)潔消毒(du):實(shi)驗(yan)前(qian)後(hou)都應進(jin)行(xing)的(de)清潔消毒(du)工作,尤(you)其(qi)是實(shi)驗(yan)完成後(hou),以(yi)確保(bao)破壞(huai)殘留的(de)DNA,降低PCR實(shi)驗(yan)的(de)頻(pin)率也(ye)是減少(shao)汙(wu)染的(de)有效(xiao)手段(duan)。
個人防(fang)護(hu):工作人員(yuan)在操作過(guo)程(cheng)中(zhong)必(bi)須(xu)佩戴手套,並(bing)經常(chang)更換(huan),特別(bie)是在加(jia)模(mo)板DNA後(hou)必(bi)須(xu)更換(huan)手套,以(yi)防(fang)止汙染。
3.試劑管理
試劑準備:試劑準備應(ying)在超(chao)凈(jing)工作臺(tai)或(huo)生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中(zhong)進(jin)行(xing),使用(yong)無汙染的(de)移(yi)液器、槍(qiang)頭及容器等進(jin)行(xing)分裝(zhuang),以保(bao)證試劑的(de)純凈(jing)性。
試劑處理:試劑管使用(yong)前應先進行(xing)瞬(shun)時(shi)離心,使液體沈於管底,減少(shao)汙(wu)染手套與(yu)加(jia)樣器的(de)機(ji)會;引物(wu)稀釋(shi)時(shi)也(ye)要(yao)首先瞬(shun)時(shi)離心,以避(bi)免粉末(mo)狀(zhuang)引物(wu)在開蓋時(shi)彈(dan)出(chu)管外(wai)。
4.設(she)備(bei)管理
設(she)備(bei)消毒(du):每次(ci)實(shi)驗(yan)前(qian)應(ying)對吸嘴(zui)、Rppendorf管、反(fan)應(ying)管、加樣(yang)器、離心管等物(wu)品進(jin)行(xing)高溫(wen)消毒(du),以(yi)確(que)保(bao)實(shi)驗(yan)的(de)無菌(jun)環境(jing)。
正確使用(yong):正確使用(yong)加樣器,吸(xi)樣(yang)時(shi)要(yao)特別(bie)小心,應緩(huan)慢(man)勻速,避免液體濺到(dao)加(jia)樣器頭(tou)上(shang),盡(jin)量(liang)壹(yi)次性吸(xi)完,忌(ji)反(fan)復(fu)多(duo)次(ci)抽吸,以(yi)免交叉(cha)汙染或(huo)產生氣(qi)溶膠。
專業培訓:所有(you)參(can)與(yu)PCR實(shi)驗(yan)的(de)人員(yuan)都應接(jie)受(shou)專業的(de)培訓(xun),了解PCR的(de)原(yuan)理、操作流(liu)程(cheng)、安(an)全(quan)規範以(yi)及應急(ji)處理措(cuo)施(shi)。
持續(xu)教育(yu):隨著(zhe)技(ji)術的(de)發(fa)展(zhan)和(he)新規定的(de)出(chu)臺(tai),實(shi)驗(yan)室人員(yuan)應定期(qi)參(can)加(jia)繼續(xu)教育(yu)和(he)技能更(geng)新(xin)培訓(xun),以保(bao)持其(qi)專(zhuan)業(ye)知(zhi)識和(he)技能的(de)現代(dai)性和(he)相關性。
6.質(zhi)量(liang)控(kong)制
內(nei)部質(zhi)控:實(shi)驗(yan)室應建立嚴(yan)格的(de)內部質(zhi)量(liang)控(kong)制體(ti)系,定期(qi)進(jin)行(xing)質(zhi)控測試,以確保(bao)實(shi)驗(yan)結果的(de)準確(que)性和(he)可靠性。
外(wai)部評(ping)估(gu):參與(yu)外(wai)部質(zhi)量(liang)評(ping)估(gu)計劃(hua),與(yu)其(qi)他實(shi)驗(yan)室進行(xing)比(bi)對,以評(ping)估(gu)和(he)提高實(shi)驗(yan)室的(de)檢(jian)測水平。
7.PCR檢(jian)測實(shi)驗(yan)室建設(she)安(an)全(quan)管理
生物(wu)安(an)全(quan):實(shi)驗(yan)室應遵守生物(wu)安(an)全(quan)管理規定,采(cai)取(qu)適當(dang)的(de)生物(wu)安(an)全(quan)措(cuo)施(shi),如使用(yong)生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)、穿(chuan)戴個人防(fang)護(hu)裝備等,以(yi)防(fang)止病原(yuan)體的(de)傳播(bo)。
化學品(pin)管理:妥(tuo)善(shan)管理和(he)存(cun)儲(chu)實(shi)驗(yan)室中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)所有(you)化學品(pin),確(que)保(bao)它們的(de)安(an)全(quan)使(shi)用(yong)和(he)處置,避(bi)免對環境(jing)和(he)人員(yuan)造(zao)成傷害(hai)。
8.環境(jing)控(kong)制
溫(wen)濕度控制:維(wei)持實(shi)驗(yan)室內適宜(yi)的(de)溫(wen)度和(he)濕度,以保(bao)證實(shi)驗(yan)條(tiao)件(jian)的(de)穩定性和(he)實(shi)驗(yan)結果的(de)可重復(fu)性。
空氣凈(jing)化:采(cai)用(yong)高效(xiao)空氣過(guo)濾(lv)系(xi)統(tong),保(bao)持實(shi)驗(yan)室空氣的(de)潔凈(jing)度,減少(shao)空氣中(zhong)顆(ke)粒物(wu)對實(shi)驗(yan)的(de)幹擾。
