PCR檢測(ce)實驗(yan)室建(jian)設(she)是壹項(xiang)在(zai)時間(jian)內體(ti)外(wai)大量(liang)擴增(zeng)特定(ding)的DNA片段的分子(zi)生物學技(ji)術。PCR實驗(yan)室或稱PCR擴增(zeng)實驗(yan)室,就是進行聚(ju)合(he)酶(mei)鏈反應(ying)的實驗(yan)場(chang)所(suo)。

PCR檢測(ce)實驗(yan)室建(jian)設(she)

PCR實驗(yan)室建(jian)設(she)基本屬於特種(zhong)實驗(yan)室建(jian)設(she)中(zhong)的(de)壹(yi)種(zhong)，例如現在我國病毒疫(yi)情頻(pin)發，就(jiu)需要(yao)各地市醫(yi)療(liao)機構(gou)進壹步加強PCR實驗(yan)室建(jian)設(she)，擴展病原(yuan)微生物的檢驗(yan)項目，提(ti)高當地衛生應(ying)急檢測(ce)能力(li)，為(wei)人民(min)群(qun)眾(zhong)的(de)身(shen)體健康(kang)保(bao)駕(jia)護航(hang)，為(wei)政績(ji)為(wei)民(min)生做出(chu)更(geng)好的(de)貢(gong)獻(xian)。是壹項(xiang)在(zai)時間(jian)內體(ti)外(wai)大量(liang)擴增(zeng)特定(ding)的DNA片段的分子(zi)生物學技(ji)術。PCR實驗(yan)室或稱PCR擴增(zeng)實驗(yan)室,就是進行聚(ju)合(he)酶(mei)鏈反應(ying)的實驗(yan)場(chang)所(suo)。   

  PCR實驗(yan)室的設(she)計(ji)

PCR實驗(yan)室的空(kong)間(jian)設(she)計(ji)有其固(gu)定的(de)模(mo)式(shi),PCR實驗(yan)室面積及(ji)實驗(yan)用房的要(yao)求基本壹致(zhi),與醫(yi)院本身或(huo)檢測(ce)機構(gou)的規模、日(ri)門診量(liang)等(deng)關(guan)系(xi)不(bu)大(da)。

PCR是由四(si)間(jian)相(xiang)鄰的(de)實驗(yan)室組成(cheng),包括(kuo)試劑準備區(qu)(產(chan)品準備區(qu))標本制(zhi)備(bei)區、擴(kuo)增(zeng)區和產(chan)物分析區(qu),通常(chang)每(mei)間(jian)面(mian)積在10m2左右(you)。在使(shi)用實時熒(ying)光(guang)PCR儀(yi)、HIV病(bing)毒載量測定儀(yi)的(de)PCR實驗(yan)時,通常(chang)可(ke)僅(jin)設立(li)三間(jian)實驗(yan)室。

       PCR實驗(yan)室的平(ping)面設(she)計(ji)有嚴格的要(yao)求,為(wei)避(bi)免(mian)汙(wu)染(ran),流(liu)線必(bi)須不(bu)可(ke)逆(ni),且只(zhi)能是按試劑備(bei)區→標本制(zhi)備(bei)區→擴(kuo)增(zeng)區→產(chan)物分析區(qu)的順(shun)序(xu)單(dan)向序(xu)列(lie)。PCR實驗(yan)室之間(jian)必(bi)須有(you)單獨的(de)內部(bu)走(zou)廊,不(bu)能使(shi)用公共走(zou)廊(lang),各實驗(yan)室間(jian)需(xu)要(yao)有傳(chuan)遞窗(chuang)進行標本無(wu)菌傳(chuan)遞,進入(ru)四(si)間(jian)實驗(yan)室之前都(dou)必(bi)須要(yao)過緩(huan)沖(chong)空間(jian)。各區必(bi)須相(xiang)互獨立(li),儀(yi)器(qi)設備(bei)和各種物品應(ying)嚴格分開(kai),不能混(hun)用。每間(jian)實驗(yan)室內須(xu)安裝紫外線燈(deng),供(gong)實驗(yan)前後進行空氣(qi)消(xiao)毒。

為(wei)保(bao)證(zheng)實驗(yan)的準確性(xing),試劑準備區(qu)及(ji)標本制(zhi)備(bei)區的(de)風壓(ya)宜(yi)呈(cheng)微正(zheng)壓(ya),以防外(wai)界含(han)核酸氣(qi)溶(rong)膠(jiao)的(de)空(kong)氣(qi)進入(ru),造成(cheng)汙(wu)染(ran),通過控(kong)制(zhi)進風風量(liang)大於排風(feng)風(feng)量達(da)到(dao)正(zheng)壓(ya)效果(guo)。擴(kuo)增(zeng)室及(ji)產(chan)物分析室應(ying)呈微負(fu)壓(ya),以防含(han)核酸的氣(qi)溶(rong)膠(jiao)擴(kuo)散(san)汙(wu)染(ran)試劑與(yu)樣品,通過控(kong)制(zhi)排(pai)風風(feng)量大(da)於進風風量(liang)達(da)到(dao)負(fu)壓(ya)效果(guo)。理(li)想情況(kuang)下(xia)緩(huan)沖(chong)內,可(ke)設(she)置正(zheng)壓(ya),使室內空(kong)氣(qi)不流(liu)向室外,室外空(kong)氣(qi)不流(liu)向室內。

PCR實驗(yan)室典型(xing)平面(mian)圖

PCR實驗(yan)室的設(she)計(ji)與建(jian)設(she)技(ji)術要(yao)求

《臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室基本設置標準》中(zhong)規定了(le)PCR實驗(yan)室每個區所(suo)需的(de)儀器(qi)設備(bei)壹覽表(biao)

PCR實驗(yan)室的裝修

⊙主(zhu)體結構(gou)：主題為(wei)彩(cai)銅板、鋁合(he)會(hui)型材(cai)。內所(suo)有陰(yin)角、陽角均(jun)采用銅合(he)金(jin)50內圓(yuan)角(jiao)鋁(lv)，從(cong)而解決(jue)容(rong)易汙(wu)染(ran)，積塵、不易清掃等(deng)問題(ti)。結構(gou)牢(lao)固(gu)，線條(tiao)簡明(ming)，美觀大方(fang)，密封(feng)性(xing)好。

⊙標準的三區(qu)分隔和氣(qi)壓(ya)調節：將(jiang)PCR過程(cheng)分成(cheng)試劑準備、標本制(zhi)備(bei)和PCR擴(kuo)增(zeng)檢測(ce)三個獨立(li)的(de)實驗(yan)區。整個區域有壹(yi)個整體緩(huan)沖走廊。每(mei)個獨立(li)實驗(yan)區設置有(you)緩沖(chong)區，同(tong)時各區通(tong)過氣(qi)壓(ya)調節，使(shi)整個PCR實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)試劑和標本免(mian)受(shou)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)的(de)汙(wu)染(ran)並降(jiang)低擴(kuo)增(zeng)產(chan)物對人(ren)員和環(huan)境(jing)的(de)汙(wu)染(ran)。可(ke)打(da)開(kai)緩沖區(qu)1,緩沖(chong)區2和PCR擴(kuo)增(zeng)區的排風扇(shan)往外(wai)排氣(qi)，在實驗(yan)區的外墻(qiang)上(shang)和各扇(shan)門上(shang)都(dou)安裝有風量可(ke)調的回(hui)風口(kou)，空(kong)氣(qi)通過回(hui)風(feng)口向室內換(huan)氣(qi)。

⊙消(xiao)毒：在(zai)三個實驗(yan)區和三個緩沖區(qu)頂部(bu)以及(ji)傳(chuan)送(song)窗(chuang)內部(bu)安裝有紫外燈(deng)，供(gong)消(xiao)毒用。在試列準備區(qu)和標本制(zhi)備(bei)區還(hai)設置移動(dong)紫(zi)外(wai)線(xian)燈，對實驗(yan)桌進行局部消(xiao)毒

⊙機械連鎖不(bu)銹鋼傳(chuan)遞窗(chuang)：試劑和標本通(tong)過機械連鎖不(bu)銹鋼(不(bu)建(jian)議(yi)使用電子(zi)連鎖方(fang)式)傳(chuan)遞窗(chuang)傳(chuan)遞，保(bao)證(zheng)試劑和標本在(zai)傳(chuan)遞過程(cheng)中(zhong)不(bu)受(shou)汙(wu)染(ran)(人物分流(liu))。

⊙地面：地面建(jian)議(yi)使用PVC卷材(cai)地面或(huo)自流(liu)坪(ping)地面，整體性(xing)好。便(bian)於進行清掃(sao)，耐(nai)腐(fu)蝕。沒(mei)有條(tiao)件(jian)的也可(ke)采(cai)用水(shui)磨(mo)石(shi)地面，或(huo)大(da)塊的(de)瓷(ci)磚(至(zhi)少(shao)800mm*800mm)接縫需要(yao)小於2mm.

⊙照明(ming)：燈(deng)具要(yao)選用凈化燈具，能達(da)到(dao)便於清洗(xi)、不積塵的特點(dian)

PCR實驗(yan)室建(jian)設(she)延申閱讀(du)

基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室的規範化設置

臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室的規範化設置詳(xiang)見《臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室管理(li)暫行辦法(fa)》(衛(wei)醫(yi)發[2002]10號文)附(fu)件(jian)《臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室基本設置標準》。為(wei)避(bi)免(mian)汙(wu)染(ran)，必(bi)須嚴(yan)格遵(zun)循《臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室設置標準》設置臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室。 臨(lin)床基因(yin)擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實驗(yan)室四(si)個隔開(kai)的工作(zuo)區(qu)域中(zhong)每(mei)壹(yi)區(qu)域都(dou)須有專(zhuan)用的儀器(qi)設備(bei)。各區域都(dou)必(bi)須有(you)明確的標記，以避(bi)免(mian)設(she)備(bei)物品如加樣器(qi)或試劑等(deng)從(cong)其(qi)各自的(de)區(qu)域內移出(chu)從而(er)造成(cheng)不(bu)同(tong)的工(gong)作(zuo)區(qu)域間(jian)設(she)備(bei)物品發生混淆(xiao)。進入(ru)各個工作(zuo)區(qu)域必(bi)須嚴(yan)格遵(zun)循單(dan)壹(yi)方(fang)向順序(xu)，即(ji)只能從(cong)試劑貯(zhu)存(cun)和準備區(qu)、標本制(zhi)備(bei)區、擴(kuo)增(zeng)反應(ying)混合(he)物配(pei)制(zhi)和擴(kuo)增(zeng)區(簡稱擴增(zeng)區)至(zhi)產(chan)物分析區(qu)，避(bi)免(mian)發(fa)生交叉汙(wu)染(ran)。在不同(tong)的工(gong)作(zuo)區(qu)域應(ying)使用不同(tong)顏色或(huo)有(you)明顯(xian)區別標誌(zhi)的(de)工作(zuo)服(fu)，以便於鑒(jian)別(bie)。此外(wai)，當工作(zuo)者(zhe)離開(kai)工作(zuo)區(qu)時，不得(de)將(jiang)各區特定(ding)的工(gong)作(zuo)服(fu)帶出(chu)。 清潔(jie)方(fang)法不(bu)當也是汙(wu)染(ran)發生的壹個主要(yao)原(yuan)因(yin)，因(yin)此(ci)實驗(yan)室的清(qing)潔(jie)應(ying)按試劑貯(zhu)存(cun)和準備區(qu)至(zhi)擴(kuo)增(zeng)產(chan)物分析區(qu)的方(fang)向進行。不同(tong)的實驗(yan)區域應(ying)有其各自的(de)清(qing)潔(jie)用具以防止(zhi)交叉汙(wu)染(ran)。

PCR實驗(yan)室建(jian)設(she)

(壹)試劑貯(zhu)存(cun)和準備區(qu)

下(xia)述操(cao)作(zuo)在(zai)該(gai)區(qu)進行：貯存(cun)試劑的(de)制(zhi)備(bei)、試劑的(de)分裝和主(zhu)反應(ying)混合(he)液(ye)的(de)制(zhi)備(bei)。

貯存(cun)試劑和用於標本制(zhi)備(bei)的材(cai)料應(ying)直(zhi)接運送(song)至(zhi)試劑貯(zhu)存(cun)和準備區(qu)，不(bu)能經(jing)過產(chan)物分析區(qu)。在打(da)開(kai)含(han)有反應(ying)混合(he)液(ye)的(de)離心(xin)管或試管前，應(ying)將(jiang)其快(kuai)速離心(xin)數秒。試劑原(yuan)材(cai)料必(bi)須貯(zhu)存(cun)在本(ben)區內，並(bing)在(zai)本區(qu)內制(zhi)備(bei)成(cheng)所(suo)需的(de)貯存(cun)試劑。當貯存(cun)試劑溶(rong)液(ye)經(jing)檢查(zha)可(ke)用後，應(ying)將(jiang)其分裝貯存(cun)備用，避(bi)免(mian)由於經常(chang)打(da)開(kai)反應(ying)管吸液(ye)而(er)造成(cheng)汙(wu)染(ran)。

含(han)反應(ying)混合(he)液(ye)的(de)離心(xin)管或試管在(zai)冰凍前都(dou)應(ying)快(kuai)速離心(xin)數秒。大多(duo)數用於擴增(zeng)的試劑都(dou)應(ying)冰凍貯(zhu)存(cun)。為(wei)避(bi)免(mian)因(yin)單(dan)次(ci)反應(ying)取液(ye)而(er)頻(pin)繁的(de)凍融(rong)主(zhu)貯存(cun)試劑，應(ying)分裝冰凍貯(zhu)存(cun)試劑溶(rong)液(ye)。貯(zhu)存(cun)試劑的(de)分裝體積根(gen)據通常在(zai)實驗(yan)室內壹(yi)次(ci)測定(ding)所(suo)需的(de)擴增(zeng)反應(ying)數來(lai)決(jue)定(ding)。

主反應(ying)混合(he)液(ye)的(de)組成(cheng)成(cheng)份(fen)尤其是聚(ju)合(he)酶(mei)的適(shi)用性(xing)和穩定(ding)性(xing)通(tong)過預試驗(yan)來(lai)檢查(zha)，評價(jia)結果(guo)必(bi)須有(you)書(shu)面(mian)報(bao)告(gao)。對於"熱(re)啟動(dong)"技(ji)術(在(zai)第(di)壹(yi)個高溫(wen)變(bian)性(xing)步(bu)驟(zhou)後加入(ru)酶)，聚(ju)合(he)酶(mei)也可(ke)不(bu)包含(han)在主反應(ying)混合(he)液(ye)中(zhong)。

在(zai)整個本區的(de)實驗(yan)操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)，操(cao)作(zuo)者(zhe)必(bi)須戴(dai)手套(tao)，並經(jing)常更(geng)換。此(ci)外，操作(zuo)中(zhong)使(shi)用壹次(ci)性(xing)帽(mao)子(zi)也(ye)是壹個有效地防止(zhi)汙(wu)染(ran)的措(cuo)施(shi)。 嚴(yan)禁用嘴(zui)吸(xi)取液(ye)體(ti)，加樣器(qi)和吸(xi)頭等(deng)必(bi)須經(jing)高壓(ya)處理(li)。

工作(zuo)結(jie)束(shu)後(hou)必(bi)須立(li)即對工作(zuo)區(qu)進行清潔(jie)。本(ben)工作(zuo)區(qu)的(de)實驗(yan)臺表面應(ying)可(ke)耐(nai)受(shou)諸(zhu)如(ru)次(ci)氯酸(suan)鈉(na)的(de)化學物質的消(xiao)毒清(qing)潔(jie)作(zuo)用。實驗(yan)臺表面的紫外照(zhao)射應(ying)方(fang)便有(you)效(xiao)。由於紫外(wai)照(zhao)射的距(ju)離和能量(liang)對(dui)去(qu)汙(wu)染(ran)的效果(guo)非(fei)常(chang)關(guan)鍵(jian)，因(yin)此(ci)可(ke)使(shi)用可(ke)移動(dong)紫(zi)外(wai)燈(deng)(254nm波長(chang))，在工(gong)作(zuo)完(wan)成(cheng)後(hou)調至(zhi)實驗(yan)臺上(shang)60~90cm內照(zhao)射(she)。由於擴增(zeng)產(chan)物僅(jin)幾百(bai)bp，對(dui)紫(zi)外線損傷不敏感(gan)，因(yin)此(ci)紫外(wai)照射擴(kuo)增(zeng)片段必(bi)須延長(chang)照射(she)時間(jian)，*好是照射(she)過夜(ye)。實驗(yan)室及(ji)其設(she)備(bei)的使(shi)用必(bi)須有(you)日(ri)常記(ji)錄(lu)。

(二)標本制(zhi)備(bei)區

下(xia)述操(cao)作(zuo)在(zai)該(gai)區(qu)進行：臨(lin)床標本的(de)保(bao)存(cun)，核酸(suan)(RNA、DNA)提(ti)取、貯(zhu)存(cun)及(ji)其加入(ru)至(zhi)擴(kuo)增(zeng)反應(ying)管和測(ce)定(ding)RNA時cDNA的合(he)成(cheng)。 要(yao)正(zheng)確使用加樣器(qi)。由於在加樣操作(zuo)中(zhong)可(ke)能會(hui)發(fa)生氣(qi)溶(rong)膠(jiao)所(suo)致的(de)汙(wu)染(ran)，所(suo)以應(ying)避(bi)免(mian)在(zai)本(ben)區(qu)內不(bu)必(bi)要(yao)的走動(dong)。可(ke)通(tong)過在(zai)本(ben)區內設(she)立(li)正(zheng)壓(ya)條(tiao)件(jian)避(bi)免(mian)從(cong)鄰近(jin)區(qu)進入(ru)本區(qu)的氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)。為(wei)避(bi)免(mian)樣(yang)本(ben)間(jian)的(de)交叉汙(wu)染(ran)，加入(ru)待測(ce)核(he)酸(suan)後，必(bi)須蓋好含(han)反應(ying)混合(he)液(ye)的(de)反應(ying)管。對具(ju)有潛在(zai)傳(chuan)染(ran)危(wei)險性(xing)的(de)材(cai)料，必(bi)須有(you)明確的樣(yang)本處(chu)理(li)和滅活(huo)程(cheng)序(xu)。 用過的(de)加樣器(qi)吸頭必(bi)須放入(ru)專門的消(xiao)毒(例(li)如(ru)含(han)次(ci)氯酸(suan)鈉(na)溶(rong)液(ye))容(rong)器(qi)內。實驗(yan)室桌椅(yi)表(biao)面(mian)每(mei)次(ci)工作(zuo)後(hou)都(dou)要(yao)清潔(jie)，實驗(yan)材(cai)料(原(yuan)始血(xue)標本、血(xue)清(qing)標本、提(ti)取中(zhong)的(de)標本與(yu)試劑的(de)混合(he)液(ye)等(deng))如(ru)出(chu)現外濺(jian)，則必(bi)須分別處(chu)理(li)並作(zuo)出(chu)記錄(lu)。 對實驗(yan)臺適(shi)當的紫(zi)外(wai)照射(254nm波(bo)長(chang)，與工(gong)作(zuo)臺(tai)面(mian)近(jin)距(ju)離)適(shi)合(he)於滅活(huo)去(qu)汙(wu)染(ran)。可(ke)移動(dong)紫(zi)外(wai)線(xian)管燈可(ke)用來(lai)確保(bao)工(gong)作(zuo)後(hou)對(dui)實驗(yan)臺面的充分照射(she)。 樣本(ben)處(chu)理(li)對核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)有很(hen)大影(ying)響(xiang)，必(bi)須使(shi)用有效的核(he)酸提(ti)取方(fang)法，可(ke)在(zai)開(kai)展臨(lin)床標本檢測(ce)前對提(ti)取方(fang)法進行評價(jia)。 用於RNA擴增(zeng)檢測(ce)樣本(ben)制(zhi)備(bei)好以後，應(ying)立即進行cDNA合(he)成(cheng)，因(yin)為(wei)cDNA鏈較(jiao)RNA穩定(ding)，保(bao)存(cun)相對(dui)容(rong)易。為(wei)保(bao)證(zheng)逆(ni)轉錄(lu)反應(ying)的需要(yao)，應(ying)在標本制(zhi)備(bei)區設(she)置壹(yi)個以上(shang)的溫(wen)育裝置。 cDNA合(he)成(cheng)的(de)理(li)想溫(wen)度依所(suo)使用的酶而定(ding)，傾向於使用壹步法：即(ji)使用在擴增(zeng)反應(ying)緩沖液(ye)條(tiao)件(jian)下具有逆(ni)轉錄(lu)活性(xing)的(de)熱(re)穩定(ding)的DNA聚(ju)合(he)酶(mei)進行逆(ni)轉錄(lu)，其較(jiao)cDNA合(he)成(cheng)後(hou)再(zai)開(kai)蓋以調節緩(huan)沖液(ye)或(huo)加入(ru)聚(ju)合(he)酶(mei)進行擴增(zeng)發生汙(wu)染(ran)的可(ke)能性(xing)降(jiang)低。 待測(ce)RNA的(de)cDNA拷(kao)貝須保(bao)存(cun)在標本制(zhi)備(bei)區，不(bu)得在(zai)本(ben)區(qu)對(dui)樣本(ben)進行PCR擴增(zeng)。

(三)擴(kuo)增(zeng)區

下述工(gong)作(zuo)在(zai)本(ben)區(qu)內進行：DNA或cDNA擴(kuo)增(zeng)。此外，已制(zhi)備(bei)的DNA模(mo)板和合(he)成(cheng)的(de)cDNA(來(lai)自樣(yang)本(ben)制(zhi)備(bei)區)的(de)加入(ru)和主(zhu)反應(ying)混合(he)液(ye)(來(lai)自試劑貯(zhu)存(cun)和制(zhi)備(bei)區)制(zhi)備(bei)成(cheng)反應(ying)混合(he)液(ye)等(deng)也(ye)可(ke)在(zai)本(ben)區(qu)內進行。在巢(chao)式(shi)PCR測定中(zhong)，通(tong)常(chang)在(zai)第壹輪擴增(zeng)後必(bi)須打(da)開(kai)反應(ying)管，因(yin)此(ci)巢式(shi)擴增(zeng)有較(jiao)高(gao)的汙(wu)染(ran)危(wei)險性(xing)，第(di)二次(ci)加樣必(bi)須在(zai)本區內進行。 不能從(cong)本(ben)區(qu)再(zai)進入(ru)任何(he)"上(shang)遊"區(qu)域，可(ke)降(jiang)低本(ben)區(qu)的氣(qi)壓(ya)以避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)從(cong)本(ben)區(qu)漏出(chu)。 為(wei)避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)所(suo)致的(de)汙(wu)染(ran)，應(ying)盡量減(jian)少(shao)在(zai)本(ben)區(qu)內的(de)走(zou)動(dong)。如(ru)有(you)加樣則應(ying)在超凈臺內進行。打開(kai)預處理(li)過的(de)反應(ying)混合(he)液(ye)時必(bi)須防止(zhi)液(ye)體(ti)濺出(chu)，尤其(qi)是在巢(chao)式(shi)擴增(zeng)步驟(zhou)之間(jian)。壹(yi)個簡單(dan)的(de)方(fang)法是在打(da)開(kai)反應(ying)管前快(kuai)速離心(xin)數秒。可(ke)使(shi)用體積較(jiao)小(xiao)的離心(xin)機，因(yin)其(qi)所(suo)占實驗(yan)臺面小，易於用壹只手操作(zuo)，適(shi)合(he)於大多(duo)數(shu)超凈臺。防潮(chao)屏障如(ru)石(shi)蠟油或輕礦(kuang)物油也具(ju)有防汙(wu)染(ran)作(zuo)用，但必(bi)須註(zhu)意(yi)的是，礦(kuang)物油本身(shen)也可(ke)能成(cheng)為(wei)壹種(zhong)持(chi)續(xu)性(xing)的(de)汙(wu)染(ran)源。用過的(de)加樣器(qi)必(bi)須註(zhu)意(yi)清潔(jie)消(xiao)毒。 完(wan)成(cheng)操(cao)作(zuo)及(ji)每天(tian)工(gong)作(zuo)後(hou)都(dou)必(bi)須對(dui)實驗(yan)室臺面(mian)進行清潔(jie)和消(xiao)毒，紫(zi)外(wai)照射方(fang)法與(yu)前面區(qu)域相同(tong)。如有(you)溶(rong)液(ye)濺(jian)出(chu)，必(bi)須處(chu)理(li)並作(zuo)出(chu)記錄(lu)。

(四(si))擴(kuo)增(zeng)產(chan)物分析區(qu)

下述操(cao)作(zuo)在(zai)本(ben)區(qu)內進行：擴增(zeng)片段的測定(ding)。 核(he)酸(suan)擴增(zeng)後產(chan)物的分析方(fang)法多(duo)種(zhong)多樣，如(ru)膜上(shang)或微(wei)孔板上(shang)探(tan)針雜(za)交方(fang)法(同(tong)位素標記或(huo)非(fei)同(tong)位素標記)、瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝膠電泳、聚(ju)丙烯(xi)酰(xian)胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸(suan)測(ce)序(xu)方(fang)法等(deng)。目前國內的(de)商(shang)品試劑盒(he)絕(jue)大部分均(jun)采用非(fei)同(tong)位素標記的(de)微(wei)孔板上(shang)探(tan)針雜(za)交方(fang)法，即(ji)PCR-ELISA方(fang)法，也(ye)有(you)膜上(shang)探(tan)針雜(za)交方(fang)法。 本(ben)區(qu)是*主要(yao)的擴增(zeng)產(chan)物汙(wu)染(ran)來(lai)源，因(yin)此(ci)必(bi)須註(zhu)意(yi)避(bi)免(mian)通(tong)過本(ben)區(qu)的物品及(ji)工作(zuo)服(fu)將(jiang)擴增(zeng)產(chan)物帶出(chu)。在使(shi)用PCR-ELISA方(fang)法檢測(ce)擴增(zeng)產(chan)物時，必(bi)須使(shi)用洗(xi)板機洗(xi)板，廢(fei)液(ye)必(bi)須收(shou)集(ji)至(zhi)1mol/L HC1中(zhong)，並(bing)且不(bu)能在(zai)實驗(yan)室內傾(qing)倒(dao)，而應(ying)至(zhi)遠(yuan)離PCR實驗(yan)室的地方(fang)棄(qi)掉(diao)。用過的(de)吸(xi)頭也(ye)必(bi)須放至(zhi)1mol/L HCl中(zhong)浸(jin)泡(pao)後(hou)再(zai)放到(dao)垃圾袋中(zhong)按程序(xu)處(chu)理(li)，如焚燒。

由於本區(qu)有(you)可(ke)能會(hui)用到(dao)某些(xie)可(ke)致(zhi)基因(yin)突(tu)變(bian)和有(you)毒物質如溴(xiu)化(hua)乙錠(ding)、丙烯(xi)酰(xian)胺、甲醛或(huo)同(tong)位素等(deng)，故(gu)應(ying)註意(yi)實驗(yan)人員的安全(quan)防護(hu)。 本(ben)區(qu)的清(qing)潔(jie)消(xiao)毒和紫(zi)外(wai)照(zhao)射方(fang)法同(tong)前面區(qu)域。本區(qu)如采(cai)用負(fu)壓(ya)條(tiao)件(jian)或減(jian)壓(ya)情況(kuang)下(xia)(如(ru)安裝排風扇(shan))可(ke)減(jian)少(shao)擴(kuo)增(zeng)產(chan)物從本(ben)區擴散至(zhi)前面區(qu)域的可(ke)能性(xing)。

了(le)解了(le)PCR實驗(yan)室的工(gong)藝標準後，我們(men)就(jiu)能大(da)致(zhi)確認PCR實驗(yan)室的布局、所(suo)需的(de)設備、整體的(de)設計(ji)裝修、PCR實驗(yan)室的通(tong)風系(xi)統(tong)、PCR實驗(yan)室建(jian)設(she)註意(yi)事項等(deng)。

航(hang)天(tian)科(ke)恩18年的(de)實驗(yan)室建(jian)設(she)施工(gong)經驗(yan)，且始(shi)終(zhong)堅(jian)持(chi)質量為(wei)天。在(zai)實驗(yan)室建(jian)設(she)領(ling)域有著(zhe)非(fei)常(chang)豐(feng)富(fu)的(de)行業(ye)積累，服務客(ke)戶近萬家。自有(you)實驗(yan)室家具(ju)生產(chan)基地，無(wu)論是實驗(yan)室標準建(jian)設(she)還是實驗(yan)室定制(zhi)建(jian)設(she)，能大(da)大(da)縮短實驗(yan)室施工(gong)裝修周(zhou)期。